如何觀察轉(zhuǎn)基因植物的GFP發(fā)光檢測(cè)方法？

轉(zhuǎn)基因植物的GFP發(fā)光檢測(cè)能用手持式雙波段熒光蛋白激發(fā)燈、手電筒式熒光蛋白激發(fā)燈、體視顯微鏡用熒光蛋白激發(fā)燈等多種光源可以激發(fā)，熒光蛋白的激發(fā)波長通常在450-480nm，發(fā)射波長在520-550nm，增強(qiáng)型熒光蛋白的激發(fā)波長在485nm，熒光蛋白激發(fā)燈能夠滿足綠色熒光蛋白和紅色熒光蛋白激發(fā)觀察。

轉(zhuǎn)基因植物的GFP發(fā)光檢測(cè)能用什么燈直接觀察么？

什么是GFP? 在生物學(xué)研究中有何用途？
GFP是綠色熒光蛋白（Green fluorescent protein， GFP），簡(jiǎn)稱GFP，20世紀(jì)60年代在水母中發(fā)現(xiàn)的發(fā)光蛋白。由238氨基酸組成的單鏈多肽，在藍(lán)光或紫外光激發(fā)下發(fā)出綠色熒光，可以起到標(biāo)記目的基因的作用。

GFP主要使用什么顏色的激發(fā)光？你觀察到得熒光是什么顏色？

GFP在藍(lán)光或紫外光激發(fā)下發(fā)出綠色熒光。綠色熒光蛋白基因是目前應(yīng)用的報(bào)告基因之一，檢測(cè)方便，只需激發(fā)光源，不需任何底物或輔助因子；材料可活體觀測(cè)，無需預(yù)處理；植物本身無綠色熒光，不會(huì)有假陽性。因此，它目前在動(dòng)物、植物、微生物的研究中已得到廣泛的應(yīng)用。

植物病毒表達(dá)載體（GFP或eGFP，RFP),農(nóng)桿菌侵染植株后，如果要觀察GFP發(fā)光，需要選用激發(fā)光源來照射植物，同時(shí)需要佩戴專用的熒光觀察眼鏡，即可觀察到明亮的GFP熒光。的雙波段光源能夠激發(fā)GFP,eGFP和RFP，無論是綠色熒光蛋白還是增強(qiáng)型綠色熒光蛋白以及紅色熒光蛋白，均能夠激發(fā)出明亮的熒光，如果需要拍照，需要選用專用遮光片才可以拍到熒光。

GFP作為一種新型的基因報(bào)告分子，可用于活體、原位、即時(shí)的檢測(cè)基因表達(dá)及蛋白定位。不象其他生物 發(fā)光基因報(bào)告分子需要附加蛋白或底物、輔物、輔因子等才會(huì)發(fā)光。GFP非常穩(wěn)定，不依賴于物種，對(duì)活細(xì)胞沒有傷害性。由于這種載體在轉(zhuǎn)染細(xì)胞后很快就能通過觀察熒光細(xì)胞而檢測(cè)出基因的表達(dá)情況，因而，為基因轉(zhuǎn)染研究中確定轉(zhuǎn)染效率。在轉(zhuǎn)基因作物的基因表達(dá)研究中，GFP（綠色熒光蛋白）可作為非常重要的衡量工具。通過定點(diǎn)觀察GFP，可有利于學(xué)習(xí)如何操縱和提高有用的染色體特性，從而可以篩選出高基因表達(dá)的植物。可提高農(nóng)作物產(chǎn)量、質(zhì)量，并不斷適應(yīng)人們對(duì)糧食的更高需求。